Оценка иммунокоррегирующего действия препарата бальзам «Возрождение»

г.Алматы, март 2001

У 13 волонтеров, получавших в течение 27 дней бальзам «Возрождение», дважды была проведена оценка иммунного статуса (перед назначением и после 27 дней приема). Исследования были проведены на базе лаборатории иммунологии Медицинского центра «Сункар», имеющей официальную лицензию Алматинского городского управления здравоохранения на выполнение клинико-иммунологические обследования.
Оценка иммунного статуса включала;
1) определение в периферической (венозной) крови общего количества лейкоцитов, лимфоцитов, лейкоформулы, 
2) относительное и абсолютное содержание основных субпопуляций лимфоцитов (общих Т-лимфоцитов, их хелперных и супрессорных субпопуляций, В-лимфоцитов, натуральных киллеров), 
3) неспецифической функциональной активности Т-лимфоцитов, уровни основных классов сывороточных иммуноглобулинов и циркулирующих иммунных комплексов, фагоцитарную и функционально-метаболическую активность нейтрофильных лейкоцитов).
Основные субпопуляции лимфоцитов идентифицировали с помощью
коммерческих наборов моноклональных антител к кластерам СВЗ+, СВ4+, СВ8+-, СВ16+, СВ72+ (российского производства) методом непрямой иммунофлюоресценции на микроскопе «Люмам И-3»; 
неспецифическую функциональную активностъ Т-лимфоцитов изучали с помощью
прямой реакции торможения миграции лейкоцитов (РТМЛ) при стимуляции клеток ФГА-Р; 
концентрацию основных классов сывороточных иммуноглобулинов (М,G,А) определяли традиционным методом иммунодиффузии в агаре с использованием коммерческих наборов моноспецифических антииммуноглобулиновых сывороток; 
концентрацию общего ІgЕ -иммуноферментным методом; циркулирующих иммунных комплексов - с помощью реакции преципитации в ПЭГ-6000, с последующим спектрофотометрированием осадков; 
фагоцитарную активность нейтрофильных лейкоцитов изучали в реакции фагоцитоза с частицами латекса и теста восстановления нитросинего тетразолия (НСТ-тест), при этом осуществлялась параллельная постановка как спонтанного, так и стимулированного пирогеналом вариантов обоих тестов.

Полученные результаты и их обсуждение.

В связи с существенной вариабельностью отдельных показателей и относительно небольшой выборки, нами в качестве более корректного и объективного анализа была оценена динамика индивидуальных показателей с учетом их исходного состояния. За достоверные изменения принимали отклонения более чем на 3%, что лежит в пределах технических ошибок субъективного учета результатов клеточных иммунологических методик исследования.
Поскольку клинические испытания продукта проводились на условно здоровых лицах, то большинство изученных иммунологических параметров находилось в пределах нормы и достоверный эффект можно было выявить только в случаях явных отклонений того или иного параметра от контрольных величин.

СВЗ+-лимфоциты (общий пул Т-лимфоцитов).

До начала исследования из 13 обследованных только у 5 относительное содержание в периферической крови

Т-лимфоцитов находилось в пределах нормы (59-69%), у остальных 8 (61,5+13,5%) -- было ниже контрольного уровня. У данных волонтеров с исходно низкими значениями: у 6 отмечалось повышение индивидуальных показателей (75,0+15,3%), в 2 случаях уровень общих Т-лимфоцитов существенно не изменился. При этом средний показатель у них повысился с 47/7+1,7% до 51/7+1,8%;
Следовательно, прием бальзама «Возрождение» существенно не влиял на нормальное содержание общих Т-лимфоцитов периферической крови, в случае же их дефицита - в 75 % случаев - существенно повышал.
Основываясь исключительной важности настоящей субпопуляции Т-лимфоцитов в реализации многих иммунологических феноменов, полученный факт повышения их количества в периферической крови необходимо расценивать как положительный иммунокорригирующий эффект испытуемой биологически активной добавки к пище бальзам «Возрождение».

СВ8+-лимфоциты (Т-супрессоры/килдеры)

Достоверное изменение индивидуальных показателей содержания в периферической крови Т-супрессоров/киллеров регистрировалось только у 7 наблюдаемых (58,3+13,7%). У остальных 8-м волонтеров этот параметр в процессе клинических испытаний сохранялся в пределах контрольного уровня. Среди 7-ми в 5 наблюдениях имело место повышение первоначально сниженных показателей до нормального уровня (19-25%) и в 2 – снижение повышенных показателей. Причем, последнее отмечалось при исходно высоком количестве данной субпопуляции Т-лимфоцитов (30 и 27%).
Полученные данные свидетельствуют о четком модифицирующем действии бальзама «Возрождение», т.е. в случаях количественного дефицита Т-супрессоров происходило нарастание их содержания, а при избытке, наоборот, -снижение.

CD4+/CD8+ (иммунорегуляторный индекс)

Соотношение Т-хелперов к Т-супресорам более объективно отражает направленности иммунорегуляторных процессов, нежели изолированные показатели обоих субпопуляций -Т-клеток. Иммунорегуляторный индекс используется в качестве одного из наиболее информативных при оценке направленности эффекта иммунокорректоров.
В 12 из 13 случаев имело место достоверное изменение индивидуальных показателей иммунорегуляторного индекса: из 6 случаев нарастания индивидуальных значений в процессе испытания в 4 (66^7+19,3%) имели место изначально низкие величины параметра (1,22-1,19-1,0-1,40, при контроле-не менее 1,5), а в двух на нижнем уровне нормы (1,65 и 1,55).

Концентрация в сыворотке крови Ig G

Перед началом апробации уровень данного класса иммуноглобулина был ниже нормы (менее 7,0 г/л) только у 3 из 13 человек. На фоне приема бальзама у всех троих концентрация IgG повысилась и достигла нижних нормативных границ. У остальных 10 с первоначально нормальными показателями все изменения индивидуальных показателей в динамике исследования происходили в контрольных пределах. Вместе с тем следует отметить, что 10 из 13 случаев (76,9+11,7%) имело место увеличение концентрации IgG в сыворотках крови, а снижение отмечалось только у одного волонтера и то при первоначально относительно высоком показателе (15,1 г/л). Полученные данные подтверждают положительный корригирующий эффект приема бальзама на уровень сывороточного иммуноглобулина класса IgG.

Концентрация сывороточного иммуноглобулина класса М

При первоначальном обследовании низкие значения (менее 0,7 г/л) были установлены в 7 случаях (53,8+13,8%). В целом повышение индивидуальных показателей регистрировалось у 11 из 13 наблюдаемых (84,6+10,0%), причем в это число входили все 13 человек с изначальным дефицитом этого класса иммуноглобулина. Незначительное уменьшение наблюдали только в 2 случаях при достаточно высоких исходных показателях (1,5 г/л, что в 3 раза выше нижней границы нормы).
Полученные данные также демонстрируют положительный корригирующий результат в отношении концентрации сывороточного иммуноглобулина класса М.

Повышение показателей индексов стимуляции ИС является положительным моментом в иммунокоррекции, т.к. отражает нарастание внутриклеточного бактерицитного резерва фагоцитарной системы.
На основании полученных данных можно сделать заключение о том, что даже в условиях нормы в половине случаев прием бальзама сопровождался положительным влиянием на функционально-метаболическую активность нейтрофильных лейкоцитов периферической крови.

Анализ результатов проведенной оценки иммунного статуса в процессе апробации бальзама «Возрождение» позволяет сделать следующее заключение.

1. В условиях приема бальзама в течении 27 дней условно здоровыми лицами у последних наблюдается достоверный иммунокорригирующий эффект, как в отношении клеточного и гуморального звеньев иммунной системы, так и клеточных факторов неспецифической резистетности организма.
2. Иммунокорригирующий эффект проявляется в достоверном повышении у большинства наблюдаемых абсолютного количества циркулирующих в периферической крови лимфоцитов, общих Т-лимфоцитов, их хелперно/индукторной и супрессорно/киллерной субпопуляции и натуральных киллеров, при этом содержание В-лимфоцитов чаще снижается.
3. В случае количественного относительного дефицита циркулирующих в периферической крови Т-лимфоцитов у 3/4 происходит нарастание их содержания. Нормальные показатели при этом существенно не изменяются.
4. Примерно в 50% наблюдений на фоне приема бальзама имеет нарастание относительных количественных параметров Т-хелперно/индукторной субпопуляции лимфоцитов, но в пределах нормативных границ,
5. Иммунокорригирующий эффект в отношении относительных количественных показателей Т-лимфоцитов с супрессорно-цитотоксическим фенотипом в повышении исходно сниженных значений и уменьшении - при
относительно высоком их уровне. 
Подобный положительный модифицирующий эффект имел место и в отношении параметров иммунорегуляторного индекса (Т-хелперы/Т-супресеоры).
6. Под влиянием приема бальзама параллельно происходит коррекция в относительном содержании циркулирующих В-лимфоцитов (снижение при исходно высоких значениях и повышение - при низких).
7. Во всех случаях низкой функциональной активности Т-лимфоцитов, по данным реакции торможения миграции лейкоцитов на ФГА, регистрировалось ее усиление. При этом нормальная функция Т-клеток существенно не изменялась.
8. На уровень сывороточных иммуноглобулинов классов М и G прием бальзама оказывает корригирующий эффект, который проявляется в нивелировании их дефицита и снижении - в случаях относительно высокого уровня.
9. При исходно низком уровне бактеридитного резерва фагоцитов (по данным из кислород-зависимого метаболизма) в 50% случаев прием бальзама опровождался его существенным повышением.
В заключении необходимо отметить, что нами был установлен Иммунокорригирующий эффект бальзама «Возрождение» в условиях нормы при относительной малом числе наблюдений. Вполне возможно, что в условиях патологии последний проявлялся бы более четче.
Настоящие результаты также можно расценивать в качестве положительного модифицирующего влияния бальзама «Возрождение» на исходно низкие значения иммунорегуляторного индекса, отражающие доминирование супрессорных процессов, что характерно для хронических инфекционных процессов, онкологической патологии и т.д.

CD 16+ - естественные киллеры

Настоящая субпопуляция лимфоцитов является ведущей в обеспечении противоракового и противовирусного иммунитета, низкие значения ее содержания в периферической крови, как правило, свидетельствуют о снижении устойчивости организма к онкологической патологии и вирусным инфекциям, неблагоприятном их течении.
Точный вывод - отсутствует отрицательное действие и имеет место тенденция к позитивной модификации.

CD72+ (В-лимфоциты)

При анализе частоты направленности динамики содержания в периферической крови В-лимфоцитов было установлено, 
модифицирующее действие кратковременного приема апробируемой биологически активной добавки к пище бальзам «Возрождение» на уровень циркулируюшдих в периферической крови В-лимфоцитов.

Анализ направленности динамики абсолютных показателей циркулирующих в периферической крови основных субпопуляций лимфоцитов позволил установить четкий корригирующий эффект кратковременного приема бальзама условно здоровыми людьми.